一小块组织,就能改变一台手术的进程。如果切除标本的边缘出现癌细胞,外科医生可考虑再切除一些组织;如果可疑肿块证实为良性,手术范围则可相应缩小。这两类发现,都要趁手术团队还能据此采取行动时,才能发挥最大的作用。[2]
冰冻切片把显微镜检查带进了这段时间。它的核心原理在于物理变化:冰冻让柔软的组织变得足够坚实,可以切成薄片,省下等待永久标本缓慢制备的时间。[1] 时间缩短了,两件事仍须确认:选取的组织是否恰当,切片上的形态是否清楚到足以支持决策?
让柔软的组织能够切成薄片
显微镜检查需要从标本上切下薄薄一层组织。常规制备时,先用福尔马林固定组织,再脱去水分,随后用石蜡包埋,为切片提供支撑。这样得到的永久切片能保留细微的组织形态,但处理过程需要时间。[1]
术中病理会诊时,新鲜组织从手术室直接送到病理科。病理医生先做肉眼检查,选出需要查看的部位,再将选取的样本放入支撑介质中冰冻、切片,转移到载玻片上并染色。染料让细胞内的各种结构在显微镜下显现出来。[2]
切割冰冻样本所用的仪器叫恒冷切片机。美国国家癌症研究所(NCI)介绍,冰冻切片检查约需 15–20分钟,同时强调,永久切片通常能保留更多细节。[1] 这份速度来自制备方法的改变,完整病理检查中的各项工作,仍各有其所需的时间。
早在 1905年12月2日发表的论文里,路易斯·B. 威尔逊(Louis B. Wilson)就明确写出了速度与清晰度之间的矛盾。他当时在梅奥实验室工作,指出既有方法有的耗时过长,让处于麻醉中的患者久等,有的则难以呈现清楚的形态。他采用的方法,是将新鲜组织置于糊精中冰冻,切成 10–15微米厚的薄片,再快速染色。[5]
今天读威尔逊的报告,其中的实际难题依然熟悉:保留足够清楚的组织形态,在手术尚能据此调整时,作出有用的判断。[5]
临床问题随标本一起送来
快速制作一张切片,需要有明确的目的。斯里兰卡病理医师学院 2021年的标本处理指南指出,冰冻切片应当用于检查结果能够影响手术方案的情况。指南也要求临床医生与病理医生讨论检查的目的和局限。[4]
这番沟通决定了怎样取材才有用。判断肿块的性质,与判断肿块切缘是否受累,需要关注的部位各有不同。评估切缘时,必须标明标本的方位,并识别需要检查的边缘。缺少这些信息,即使显微镜下有所发现,也很难据此调整手术。[4]
试想,报告说某一处边缘有癌细胞,现场却无法确定这处边缘对应患者体内的哪个位置。癌细胞已经辨认出来,手术要解决的问题仍然悬而未决。标记和定向,也因此属于诊断过程本身。
决策的影响还延伸到切片之外。美国癌症协会解释,追加切除组织有助于处理受累切缘,同时也带来风险,需要外科医生权衡。病理结果是作出选择的依据之一,获益与并发症之间的取舍,仍须结合手术情况判断。[2]
低温所能解决的事有限
冰冻有时会使待观察的组织形态发生变形。奥克兰医院的冰冻切片检查指南将冰晶伪影列为显微细节清晰度下降的一个原因,并另行指出取材的局限:细小病灶有时落在所检查切片的范围之外。[6]
这两种情况缺失的信息各不相同。前一种,相关组织已经在载玻片上,形态却发生了改变;后一种,切片即使清晰易读,重要病灶仍在别处。没有取到的细胞,无法靠提高图像质量显现出来。
增加取材也要付出时间。斯里兰卡的指南指出,多份活检组织需要更长时间来处理和判读,脂肪组织或纤维组织也较难切片。[4] 送到实验室的组织本身,就会影响一份有用的结果能多快得出。
奥克兰医院列出的时限是:仅需制作一个组织块的病例,自实验室接收标本起计30分钟,复杂程度还会影响出结果的时间。[6] 这项本地服务的预计用时与NCI给出的一般估计,所涵盖的范围各有不同,比较时须先分清计时口径。患者或家属等待得更久,单凭这一点无法推断诊断结果。
有些情况下,合适的做法是暂缓诊断,等永久切片制成后再作判断。奥克兰医院明确说明,当冰冻组织不足以支持可靠判读时,可以这样处理。[6] 暂缓诊断把尚未确定的部分如实留在报告中,避免在求快的压力下给出过于笃定的结论。
结果传达之后,检查仍在继续
快速判读会留下可供复核的记录。美国病理医师学院(CAP)2025年3月的标本处理指南要求保留术中切片,并将已检查组织的剩余部分制成石蜡切片,与冰冻切片的判读结果对照。术中会诊结果也应纳入最终的外科病理报告。[7]
沟通同样关系到检查能否前后衔接。CAP规定,结果须直接以口头方式报告给术中医疗或外科团队,报告前先确认患者身份。[7] 一项发现要真正用于临床,既要对应正确的患者和标本,也要让接收结果的人准确理解。
这一连串工作连接着诊疗中的两个时刻。手术进行时,团队需要针对一个具体问题的答案,以便作出眼前的选择;手术之后,病理科再按病例所需,补足形态细节和进一步检查。冰冻切片之所以能快,在于它集中回答一个特定问题,也明确交代这个问题何时还须等待答案。
参考来源
- 美国国家癌症研究所,《病理报告》——冰冻标本与永久标本的制备、显微镜检查及快速检查的大致用时。
- 美国癌症协会,《活检如何进行?》,2026年3月24日修订——标本选取、冰冻切片流程与手术切缘决策。
- 000jaw,《Tissue for frozen section in cryostat.JPG》,2010年2月17日,Wikimedia Commons——原始照片、图片说明及CC BY 3.0署名信息。
- 斯里兰卡病理医师学院,《组织病理学国家指南:外科标本的采集、处理与运输》,第2版,2021年,印刷页码45–47页——适应证、定向、取材与技术局限。
- 路易斯·B. 威尔逊,《用于显微镜检查的新鲜组织快速制备法》,JAMA 45(23):1737,1905年12月2日——快速冰冻、切片和染色方法的原始报告。
- 北部地区病理网络、奥克兰医院,《冰冻切片(新鲜组织)》,2026年6月15日更新——服务周转时间、冰冻伪影、取材局限与暂缓诊断。
- 美国病理医师学院,《外科病理标本处理实用指南》,12.0版,2025年3月,第23–25页——术中报告、切片留存及与石蜡切片的对照。